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पंजाबी परिवार से तालूक रखने वाली रति अग्निहोत्री का जन्म 10 नवंबर 1960 को बॉम्बे में हुआ था।
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दस साल की उम्र में रति ने मॉडलिंग की दुनिया में कदम रखा। जब रति स्कूल में थे तब उन्होंने कई थिएटर प्रदर्शनों में भाग लिया।
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स्कूल का खेल वह जगह है जहाँ रति का करियर शुरू हुआ क्योंकि तभी निर्देशक भारतीराजा ने उस पर ध्यान दिया। रति के प्रदर्शन को देखकर उन्होंने अपनी फिल्म के लिए रति को चुना।
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रति सिर्फ सोलह साल की थी जब उन्हें अपनी पहली फिल्म में अभिनय करने का निमंत्रण मिला। वह अपनी पहली फिल्म वाथिया पुरगुल (1979) को लेकर बहुत खुश थीं।
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इस फिल्म में उनके अभिनय से जनता काफी प्रभावित हुई थी। इस फिल्म में काम करने वाली रति ने महज तीन साल में 32 तेलुगू फिल्मों में काम किया।
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रति ने हिंदी फिल्मों में प्रदर्शन किया और रजनी कांत, कमल हासन और अन्य प्रमुख दक्षिण कलाकारों के साथ दिखाई दीं।
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फिल्म कुली में बॉलीवुड के महानायक अमिताभ बच्चन के साथ काम किया था। फिल्म तवायफ के साथ उन्हें फिल्मफेयर अवॉर्ड के लिए भी नॉमिनेट किया गया था।
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शादी के बाद रति ने अपने अभिनय से काफी दूरी बना ली। उसके बाद, वह अपने अंतिम दर्शन के 16 साल बाद फिल्म कुछ खट्टी कुछ मीठी के साथ बड़े पर्दे पर बापसी की